Endre søk
RefereraExporteraLink to record
Permanent link

Direct link
Referera
Referensformat
  • apa
  • ieee
  • modern-language-association-8th-edition
  • vancouver
  • Annet format
Fler format
Språk
  • de-DE
  • en-GB
  • en-US
  • fi-FI
  • nn-NO
  • nn-NB
  • sv-SE
  • Annet språk
Fler språk
Utmatningsformat
  • html
  • text
  • asciidoc
  • rtf
Extraction method comparison for PCR analysis of human samples
KTH, Skolan för kemi, bioteknologi och hälsa (CBH), Kemi.
2023 (engelsk)Independent thesis Advanced level (degree of Master (Two Years)), 20 poäng / 30 hpOppgaveAlternativ tittel
Utvärdering av extraktionsmetoder inför PCR analys av humana prov (svensk)
Abstract [sv]

Den här studien genomfördes för att jämföra två instrumentuppsättningar, EasyMag och Kingfisher Flex, med avseende på effektivitet i förmåga att extrahera DNA och RNA inför diagnostiska tester med PCR. Studien utfördes SYNLAB Sverige AB i samband med avslutandet av allmän screening för Covid-19 och övergång till IVDR godkända instrument. Extraktionerna analyserades i diagnostiska test av olika ursprung (Sars-CoV-2 RNA, dermatofyt DNA och human genotypning av laktosintolerans LCT-13910 variant). Projektet inkluderar testning och utvärdering av instrumentens extraktionsförmåga samt diskussion kring när respektive instrument lämpar sig mer. Analyserna visade ingen signifikant skillnad mellan kvalitén i något av de extraherade materialen, men det fanns en antydan till att EasyMag extraherade dermatofyter effektivare (spädning serie-experimentet p=0,00006, n=15; övergripande analys p=0,057, n=35, parat t-test), i synnerhet då koncentrationerna var låga. Från ett handhavande perspektiv var EasyMag enklare att variera mellan de olika extraktions metoderna, medan Kingfisher var behändigare när man arbetade med fler prover. Därför är slutsatserna att Kingfisher är lämpligare vid höga provvolymer låg variation av metoder medan EasyMag är lämpligare med mindre provvolymer och många olika extraktions metoder.

Abstract [en]

In this study, a comparison between the capabilities of two different systems for extraction of DNA and RNA, EasyMag and Kingfisher Flex, for downstream use in real-time RT PCR-based diagnostic tests was performed. The project was completed at SYNLAB Sverige AB in conjunction with the discontinuation of public screening of Covid-19 and transitioning into IVDR-approved instruments. The extractions were evaluated in diagnostic tests of different type of samples (Sars-CoV-2 RNA, dermatophytes DNA, and human DNA genotyping of lactose intolerance genetic variants LCT-13910). This report describes the testing and evaluation of the extraction capabilities and discussion around the choice of instruments. The analysis proved no statistically significant difference between the quality of the extracted sample for neither analysis, but there was an indication that EasyMag extracted low concentration of dermatophytes more efficiently, especially at lower concentrations (dilution series p=0.00006, n=15; overall analysis p=0,057, n=35). In the aspect of working with the instruments, EasyMag was more manageable to swap between extraction methods, while Kingfisher excelled at higher sample volumes. Thus, Kingfisher is more appropriate with a larger number of samples with lower extraction method variance and EasyMag with fewer samples with more variation in extraction methods.

sted, utgiver, år, opplag, sider
2023.
Serie
TRITA-CBH-GRU ; 2023:038
Emneord [sv]
PCR, RNA, DNA, diagnostik, Sars-Cov-2, PCR, RNA, DNA, diagnostics, SARS-Cov-2
HSV kategori
Identifikatorer
URN: urn:nbn:se:kth:diva-324235OAI: oai:DiVA.org:kth-324235DiVA, id: diva2:1739048
Eksternt samarbeid
SYNLAB Sverige AB
Fag / kurs
Chemical Science and Engineering
Utdanningsprogram
Degree of Master - Molecular Science and Engineering
Examiner
Tilgjengelig fra: 2023-02-23 Laget: 2023-02-23 Sist oppdatert: 2025-02-20

Open Access i DiVA

fulltext(688 kB)370 nedlastinger
Filinformasjon
Fil FULLTEXT01.pdfFilstørrelse 688 kBChecksum SHA-512
3e29df482319df965a1b891cb9434a3555fbe5bae019bcb2b07235e07e88ba34a09bc52028d7db1dfea363fb37c5089f1adf925d8d43adcbbd053c6f477f2e79
Type fulltextMimetype application/pdf

Av organisasjonen

Søk utenfor DiVA

GoogleGoogle Scholar
Totalt: 370 nedlastinger
Antall nedlastinger er summen av alle nedlastinger av alle fulltekster. Det kan for eksempel være tidligere versjoner som er ikke lenger tilgjengelige

urn-nbn

Altmetric

urn-nbn
Totalt: 430 treff
RefereraExporteraLink to record
Permanent link

Direct link
Referera
Referensformat
  • apa
  • ieee
  • modern-language-association-8th-edition
  • vancouver
  • Annet format
Fler format
Språk
  • de-DE
  • en-GB
  • en-US
  • fi-FI
  • nn-NO
  • nn-NB
  • sv-SE
  • Annet språk
Fler språk
Utmatningsformat
  • html
  • text
  • asciidoc
  • rtf