Ändra sökning
RefereraExporteraLänk till posten
Permanent länk

Direktlänk
Referera
Referensformat
  • apa
  • harvard1
  • ieee
  • modern-language-association-8th-edition
  • vancouver
  • Annat format
Fler format
Språk
  • de-DE
  • en-GB
  • en-US
  • fi-FI
  • nn-NO
  • nn-NB
  • sv-SE
  • Annat språk
Fler språk
Utmatningsformat
  • html
  • text
  • asciidoc
  • rtf
Production of a Thermostable DNA Polymerase by Site-Specific Cleavage of a Heat-Eluted Affinity Fusion Protein
KTH, Tidigare Institutioner                               , Biokemi och biokemisk teknologi.ORCID-id: 0000-0002-5391-600X
KTH, Tidigare Institutioner                               , Biokemi och biokemisk teknologi.
KTH, Tidigare Institutioner                               , Biokemi och biokemisk teknologi.ORCID-id: 0000-0001-8993-048X
Visa övriga samt affilieringar
1997 (Engelska)Ingår i: Protein Expression and Purification, ISSN 1046-5928, E-ISSN 1096-0279, Vol. 9, s. 125-132Artikel i tidskrift (Refereegranskat) Published
Abstract [en]

A novel strategy is described for bacterial expression and affinity purification of a recombinant truncated version of the heat-stable DNA polymerase I fromThermus aquaticus.The DNA polymerase ([Delta]Taq) was produced as a fusion to a serum albumin binding affinity handle (ABP) derived from streptococcal protein G. Based on the thermostability of the [Delta]TaqDNA polymerase, affinity-purified ABP-[Delta]Taqcould be heat-eluted from HSA columns by incubation at 85ï¿œC. To produce free [Delta]TaqDNA polymerase, efficient site-specific cleavage of the affinity tag was performed using a recombinant coxsackievirus 3C protease (3Cpro), also produced as an ABP affinity fusion. Thus, an integrated strategy could be devised where both the cleaved ABP affinity tag and the protease fusion could be recovered after site-specific cleavage using HSA-affinity chromatography. The flow-through fraction contained essentially pure [Delta]TaqDNA polymerase with full enzymatic activity.

Ort, förlag, år, upplaga, sidor
1997. Vol. 9, s. 125-132
Nationell ämneskategori
Biokemi och molekylärbiologi
Identifikatorer
URN: urn:nbn:se:kth:diva-13273DOI: 10.1006/prep.1996.0674OAI: oai:DiVA.org:kth-13273DiVA, id: diva2:323028
Anmärkning
QC 20100609Tillgänglig från: 2010-06-09 Skapad: 2010-06-09 Senast uppdaterad: 2017-12-12Bibliografiskt granskad
Ingår i avhandling
1. Protein Engineering by Directed Evolution and Rational Design
Öppna denna publikation i ny flik eller fönster >>Protein Engineering by Directed Evolution and Rational Design
2001 (Engelska)Doktorsavhandling, sammanläggning (Övrigt vetenskapligt)
Ort, förlag, år, upplaga, sidor
Stockholm: KTH, 2001. s. 87
Nyckelord
ion-exchange chromatography, subtilisin, Klenow DNA polymerase, Taq DNA polymerase, directed evolution, rational design, charge engineering, phosphonylating inhibitor, phage display, circular dichroism, protein A
Nationell ämneskategori
Industriell bioteknik
Identifikatorer
urn:nbn:se:kth:diva-3171 (URN)91-7283-102-2 (ISBN)
Disputation
2001-06-01, 00:00
Anmärkning
QC 20100609Tillgänglig från: 2001-05-31 Skapad: 2001-05-31 Senast uppdaterad: 2010-06-09Bibliografiskt granskad

Open Access i DiVA

Fulltext saknas i DiVA

Övriga länkar

Förlagets fulltexthttp://www.sciencedirect.com/science/article/B6WPJ-45KKW49-42/2/03c036fd1bf934b0f3d5fd8d3c0995f3

Personposter BETA

Gräslund, TorbjörnUhlén, MathiasNygren, Per-Åke

Sök vidare i DiVA

Av författaren/redaktören
Gräslund, TorbjörnUhlén, MathiasNygren, Per-Åke
Av organisationen
Biokemi och biokemisk teknologi
I samma tidskrift
Protein Expression and Purification
Biokemi och molekylärbiologi

Sök vidare utanför DiVA

GoogleGoogle Scholar

doi
urn-nbn

Altmetricpoäng

doi
urn-nbn
Totalt: 266 träffar
RefereraExporteraLänk till posten
Permanent länk

Direktlänk
Referera
Referensformat
  • apa
  • harvard1
  • ieee
  • modern-language-association-8th-edition
  • vancouver
  • Annat format
Fler format
Språk
  • de-DE
  • en-GB
  • en-US
  • fi-FI
  • nn-NO
  • nn-NB
  • sv-SE
  • Annat språk
Fler språk
Utmatningsformat
  • html
  • text
  • asciidoc
  • rtf