Ändra sökning
RefereraExporteraLänk till posten
Permanent länk

Direktlänk
Referera
Referensformat
  • apa
  • harvard1
  • ieee
  • modern-language-association-8th-edition
  • vancouver
  • Annat format
Fler format
Språk
  • de-DE
  • en-GB
  • en-US
  • fi-FI
  • nn-NO
  • nn-NB
  • sv-SE
  • Annat språk
Fler språk
Utmatningsformat
  • html
  • text
  • asciidoc
  • rtf
Real-Time Monitoring of Neurovascular Cells
KTH, Skolan för elektroteknik och datavetenskap (EECS), Mikro- och nanosystemteknik.
2018 (Engelska)Självständigt arbete på avancerad nivå (masterexamen), 20 poäng / 30 hpStudentuppsats (Examensarbete)
Abstract [en]

Organs-on-a-chip devices are perfused cell culture systems aimed at creating the minimal functional unit of an organ - suchas the neurovascular unit (NVU) of the brain. NVU-on-a-chip platforms can provide an effective framework for studyingcentral nervous system physiology, disease etiology and provide a mean for drug development.In this work, we investigated the possibility of developing NVU-on-a-chip devices, with real-time sensing capabilitiesof glucose - intended for monitoring the metabolic activity of neurovascular cells. This was done by evaluating theperformance and applicability of in-house ultra-miniaturized glucose sensor technology and commercial DropSence (DS)electrodes, as well as studying astrocytoma characteristics.Firstly the performance of the amperometric microsensors was assessed - demonstrating a sufficient linear detectionrange (6, 2±0, 7 mM) for monitoring normal glucose levels of the brain (0, 5−1, 5 mM) and a high sensitivity (0, 09±0, 02mA/mM/mm2) . Limit of detection (LOD) ranged between 0, 04 mM for the 3_2 model microsensor to up to to 0, 14±0, 05mM for the DS electrodes. Limit of detectable change (LO4S), obtained from deviations between repeated measurements,was found to be approximately 0, 6 mM for all the sensors - close to the normal glucose concentrations of the brain. Limitof detectable change (LO4N), obtained from signal-noise within single measurements, was smallest for the biggest DSelectrodes (0, 04 mM).Secondly the compatibility of sensor materials (substrate and functional membranes) with astrocytoma cells was tested.Cell viability and growth, in conjunction with test materials, were assessed and compared to that of glass and/or cellculturetreated polystyrene (plastic). The materials tested were: Nafion; polyurethane (PU); Glucose Oxidase/bovineserum albumin/glutaraldehyde (GOx/GA); and silicon substrate with SiO2 surface. Cell viability and growth provedalmost as good on nafion membrane as on plastic and glass, while the enzyme containing layer proved to be toxic - mostlikely due to the protein-reactive crosslinker glutaraldehyde. PU-membrane showed significantly lower performance thanglass but demonstrated the best ability to encapsulate the toxic effect of the innermost enzyme layer. In contrast, nafioncoverage resulted in a lack of cells adjacent to the membrane - suggesting partial permeability to the harmful compoundsof the innermost layer. The SiO2surface of the silicon substrate, demonstrated significantly lower performance than plasticin terms of cell viability and growth.Thirdly glucose uptake rates of astrocytoma cell were determined. Depending on glucose availability in the the test wellsthe cells demonstrated a wide range of uptake rates: between 6, 5 · 10

Abstract [sv]

Organ-på-ett-chip enheter är perfusionerade cellodlingssystem ämnade till att återskapa den minimala funktionella enhetav ett organ - såsom hjärnans neurovaskulära enhet (NVE). NVE-på-ett-chip plattformar kan tillhandahålla ett effektivtverktyg för studier av centrala nervesystemets fysiologi, sjukdomsteori och läkemedelsutveckling.I det här arbetet undersökte vi möjligheten att utveckla NVE-på-ett-chip enheter, med capacitet for realtidsmätning avglukos - avsedda för att studera neurovaskulära cellers metaboliska aktivitet. Detta gjordes genom att utvärdera prestandaoch användbarhet av microsensor-teknik och kommersiella DropSence (DS) -elektroder, samt studera egenskaperna hosastrocytom.Först bedömdes prestandan hos de amperometriska mikrosensorerna, som demonstrerade ett linjärt detekteringsområde(6, 2 ± 0, 7 mM), tillräckligt för övervakning av normala glukosnivåer i hjärnan (0, 5 − 1, 5 mM) och en hög känslighet(0, 09 ± 0, 02 mA/mM/mm2). Detektionsgränserna (LOD) varierade mellan 0, 04 mM för mikrosensornas 3_2 modellupp till 0, 14 ± 0, 05 mM för DS-elektroderna. Gränsen för detekterbar förändring (LO4S), baserad på avvikelser mellanupprepade mätningar, var ungefär 0, 6 mM för alla sensorer - nära de normala glukoskoncentrationerna i hjärnan. Gränsenför detekterbar förändring (LO4N), baserad på signalbrus inom individualla mätningar, var minst för de största DSelektroderna(0, 04 mM).Sedan testades kompatibiliteten hos sensormaterial (substrat och funktionella membran) med astrocytom celler. Cellersöverlevnad och tillväxt bstuderades i anslutning med testmaterialen, och jämfördes med den hos glas och/eller cellkulturbehandladpolystyren (plast). De material som testades var: Nafion; polyuretan (PU); Glukosoxidas/bovint serumalbumin/glutaraldehyd (GOx/GA); och kiselsubstrat med dess naturliga SiO2yta. Cellöverlevnad och tillväxt visade sigvara nästan lika bra på nafionmembran som på plast och glas, medan skiktet innehållande enzymet (GOx) visade sig varagiftigt - troligen på grund av det proteinreaktiva tvärbindningsmedlet glutaraldehyd. PU-membranen visade signifikantlägre prestanda än glas men demonstrerade den bästa förmågan att inkapsla den giftiga effekten av det enzymskiktet. Atttäckning med nafion resulterade däremot i en avsaknad av celler intill membranet - vilket tyder på partiell permeabilitetav de skadliga ämnena i det innersta lagret. SiO2-ytan av kiselsubstratet visade signifikant lägre prestanda än plast vadgäller celllöverlevnad och tillväxt.Slutligen bestämdes glukosupptagningshastigheter för astrocytom celler. Beroende på tillgången av glukos i testbrunnarnavisade cellerna ett brett spektrum av upptagshastigheter: mellan 6, 5 · 10

Ort, förlag, år, upplaga, sidor
2018. , s. 51
Serie
TRITA-EECS-EX ; 2018:50
Nationell ämneskategori
Teknik och teknologier
Identifikatorer
URN: urn:nbn:se:kth:diva-231847OAI: oai:DiVA.org:kth-231847DiVA, id: diva2:1230358
Utbildningsprogram
Teknologie masterexamen - Nanoteknik
Handledare
Examinatorer
Tillgänglig från: 2018-07-03 Skapad: 2018-07-03 Senast uppdaterad: 2018-07-03Bibliografiskt granskad

Open Access i DiVA

fulltext(46851 kB)69 nedladdningar
Filinformation
Filnamn FULLTEXT01.pdfFilstorlek 46851 kBChecksumma SHA-512
85350c54bfc16ecb707e07f822541aa668fe6a4e31576b01073100bab3cba6f4a830f61d9fe7ffb144f38d56f8c1e7db7686f25f2e20cc615ebe62a22223160d
Typ fulltextMimetyp application/pdf

Av organisationen
Mikro- och nanosystemteknik
Teknik och teknologier

Sök vidare utanför DiVA

GoogleGoogle Scholar
Totalt: 69 nedladdningar
Antalet nedladdningar är summan av nedladdningar för alla fulltexter. Det kan inkludera t.ex tidigare versioner som nu inte längre är tillgängliga.

urn-nbn

Altmetricpoäng

urn-nbn
Totalt: 445 träffar
RefereraExporteraLänk till posten
Permanent länk

Direktlänk
Referera
Referensformat
  • apa
  • harvard1
  • ieee
  • modern-language-association-8th-edition
  • vancouver
  • Annat format
Fler format
Språk
  • de-DE
  • en-GB
  • en-US
  • fi-FI
  • nn-NO
  • nn-NB
  • sv-SE
  • Annat språk
Fler språk
Utmatningsformat
  • html
  • text
  • asciidoc
  • rtf