kth.sePublications
Change search
CiteExportLink to record
Permanent link

Direct link
Cite
Citation style
  • apa
  • ieee
  • modern-language-association-8th-edition
  • vancouver
  • Other style
More styles
Language
  • de-DE
  • en-GB
  • en-US
  • fi-FI
  • nn-NO
  • nn-NB
  • sv-SE
  • Other locale
More languages
Output format
  • html
  • text
  • asciidoc
  • rtf
Synthetic biology for novel chemical-producing anaerobic pathways
KTH, School of Engineering Sciences in Chemistry, Biotechnology and Health (CBH), Industrial Biotechnology.
2022 (English)Independent thesis Advanced level (degree of Master (Two Years)), 20 credits / 30 HE creditsStudent thesisAlternative title
Syntetisk biologi för nya kemikalieproducerande anaeroba reaktionsvägar (Swedish)
Abstract [sv]

Genmodifiering kan användas för att introducera nya metabola vägar för produktion av kemikalier i mikroorganismer i anaeroba processer. För att maximera produktionen av en given kemikalie, bör mikroorganismens parametrar för tillväxt och produktion vara kända, då det möjliggör en optimerad produktionsprocess. Detta projekt syftade till att designa och utföra en kvantitativ fysiologisk analys av en genmodifierad Saccharomyces cerevisiae-stam för produktion av baskemikalien (R,R)-2,3- butandiol (2,3-BDO). För att uppskatta stammens tillväxtparametrar modellerades den genom en stökiometrisk modell och en enzymbegränsad genomskalemodell innan den undersöktes i anaeroba batchodlingar. Resultaten från odlingarna var ofullständiga, men indikerade att genomskalemodellen var  mer  korrekt  än  den  stökiometriska modellen gällande  tillväxthastigheter  och  utbyten. Labbevolution genom upprepade reinokuleringar av den 2,3-BDO-producerande S. cerevisiae- stammen utfördes efter hypotesen att det kunde öka stammens tillväxthastighet och därmed hastigheten av den tillväxtkopplade 2,3-BDO-produktionen, men ingen ökning i tillväxthastigheten över tid kunde påvisas. Då genomskalemodellen gav att den optimala tillväxthastigheten borde vara densamma som det som erhölls experimentellt, är det möjligt att stammen redan växte vid en optimal tillväxthastighet och istället kan ha anpassat sig till att bli tåligare mot sura miljöer, dock undersöktes inte detta i detta projekt. Då genomskalemodellen enkelt kan anpassas för andra genotyper och produktionsvägar hos S. cerevisiae och ge tillväxtparametrar som överensstämmer med experimentella data, kan den ses som ett användbart verktyg för modellering av genmodifierade S. cerevisiae-stammar.

Abstract [en]

Since the introduction of genome editing, novel chemical-producing metabolic pathways can be introduced to microorganisms and designed for anaerobic processes. For an efficient production process, the growth parameters of the mutated microorganism must be known as they allow for tailored production systems that can maximise the production of the desired chemical. This project aimed at designing and performing a quantitative physiological analysis of a mutated Saccharomyces cerevisiae strain capable of producing the commodity chemical (R,R)-2,3-butanediol (2,3-BDO). The strain was modelled using a stoichiometric model and a genome scale model with enzyme constraints (GEM) in order to predict the strain’s growth parameters, and was then investigated in anaerobic batch cultivations. The results from the batch cultivations were inconclusive, but indicated that the GEM was more accurate in predicting the growth rates and yields of the strain than a model based on reaction stoichiometry alone. Laboratory evolution through repeated reinoculations of the S. cerevisiae strain was performed as it was hypothesised that it could increase the growth rate and thereby the rate of the growth coupled 2,3-BDO production, however, no increase in the maximum growth rate was obtained. As the GEM predicted an optimal growth rate similar to what was obtained experimentally, it is possible that the strain was already growing at an optimal maximum growth rate and instead may have adapted to become more acid tolerant, although this was not investigated in this project. Due to the versatility and accuracy of the GEM used, it is concluded that it may be a valuable tool for modelling mutated S. cerevisiae strains.

Place, publisher, year, edition, pages
2022.
Series
TRITA-CBH-GRU ; 2022:180
Keywords [en]
2, 3-Butanediol, Saccharomyces cerevisiae, Metabolic engineering, Enzyme constrained genome scale model, Anaerobic cultivation
Keywords [sv]
2, 3-Butanediol, Saccharomyces cerevisiae, Metabolic engineering, Enzymbegränsad genomskalemodell, Anaerob odling
National Category
Industrial Biotechnology
Identifiers
URN: urn:nbn:se:kth:diva-314454OAI: oai:DiVA.org:kth-314454DiVA, id: diva2:1672923
Subject / course
Biotechnology
Educational program
Master of Science - Industrial and Environmental Biotechnology
Supervisors
Available from: 2022-06-20 Created: 2022-06-20 Last updated: 2022-06-25

Open Access in DiVA

No full text in DiVA

By organisation
Industrial Biotechnology
Industrial Biotechnology

Search outside of DiVA

GoogleGoogle Scholar

urn-nbn

Altmetric score

urn-nbn
Total: 113 hits
CiteExportLink to record
Permanent link

Direct link
Cite
Citation style
  • apa
  • ieee
  • modern-language-association-8th-edition
  • vancouver
  • Other style
More styles
Language
  • de-DE
  • en-GB
  • en-US
  • fi-FI
  • nn-NO
  • nn-NB
  • sv-SE
  • Other locale
More languages
Output format
  • html
  • text
  • asciidoc
  • rtf